分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2018-12-16 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 利用大孔吸附树脂DA-201为载体对海洋脂肪酶固定化，并探寻添加剂对固定化过程的影响。分别以NH4Cl、甘露糖和甘氨酸为添加剂，采用单因素和正交实验相结合的方法优化条件。结果显示，以NH4Cl为添加剂的最优条件：柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液pH 6.0，固定化温度30℃，载体投放量0.5g，NH4Cl浓度为25mmol/L，固定化时间3.0h，酶活力达到115.27U/g；比不含有添加剂的固定化酶固定化效率提高47.42%。以甘露糖为添加剂最有条件：磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液pH7.0，固定化温度35℃，载体投放量0.5g，甘露糖浓度10mmol/L，固定化时间4.5h；酶活力达到122.75U/g，比不含有添加剂的固定化酶固定化效率提高6.50%。以甘氨酸为添加剂的最优条件：磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液pH7.0，固定化温度20℃，载体投放量0.5g，甘氨酸浓度为25mmol/L，固定化时间7.5h；酶活力达到141.69U/g，比不含有添加剂的固定化酶固定化效率提高26.12%。采用不同添加剂对大孔吸附树脂DA-201的吸附固定化过程有较大影响，可以极大的提高吸附效率；同时发现缓冲液类型、pH、温度、添加剂浓度和固定化时间等对DA-201树脂吸附脂肪酶有很大影响，对后续吸附固定化工业酶研究有较好的参考价值。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-11-21 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 以海藻酸钠、羧甲基纤维素钠（CMC）为载体，分别以乙二醇缩水甘油醚（EGDE）和戊二醛为交联剂，采用包埋交联法对脂肪酶进行固定化，结果显示EGDE的交联效果要优于戊二醛，添加EGDE的固定化酶酶活最好。得到制备固定化酶的最优方案为海藻酸钠2.5%，CMC 浓度1.5%，给酶量800 U/mL复配载体，氯化钙5%，以0.02%的EGDE交联固定30 min，由此制备得到酶活约为380 U/g的固定化酶。固定化酶的最适反应pH为8.5，比游离酶增大0.5个单位；最适反应温度是45℃，比游离酶提高5℃；耐热性能变好，且重复使用7次后仍能保持60%左右的相对酶酶活。
分类： 生物学 >> 生物工程 提交时间： 2017-11-21 合作期刊: 《中国生物工程杂志》
摘要： 以海藻酸钠、羧甲基纤维素钠（CMC）为载体，分别以乙二醇缩水甘油醚（EGDE）和戊二醛为交联剂，采用包埋交联法对脂肪酶进行固定化，结果显示EGDE的交联效果要优于戊二醛，添加EGDE的固定化酶酶活最好。得到制备固定化酶的最优方案为海藻酸钠2.5%，CMC 浓度1.5%，给酶量800 U/mL复配载体，氯化钙5%，以0.02%的EGDE交联固定30 min，由此制备得到酶活约为380 U/g的固定化酶。固定化酶的最适反应pH为8.5，比游离酶增大0.5个单位；最适反应温度是45℃，比游离酶提高5℃；耐热性能变好，且重复使用7次后仍能保持60%左右的相对酶酶活。
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